SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit
产品名称:SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit
货号:BG892218
批号:240827K02
相关类别:试剂盒
目录价格:2442元(含税报价)
规格:500T
使用说明:
1.One-Step qRT-PCR反应体系的设置:
a.融解并混匀One-Step qRT-PCR反应所需的各种溶液,置于冰浴上或冰盒内。
b.参考下表在室温或冰浴上设置One-Step qRT-PCR反应体系(以96孔板,每孔反应体系为20μl为例):
Reagent | Volume | Final Concentration |
SYBR Green One-Step Reaction Buffer (2X) | 10µl | 1X |
SYBR Green One-Step Enzyme Mix (10X) | 2μl | 1X |
Forward and Reverse Primer Mix (3μM each) | 2µl | 300nM |
Template RNA | 2μl | 1pg-2µg |
Without or Low/High ROX (50X) | 0.4µl | 1X |
RNase-Free Water | Up to 20μl | - |
2.One-Step qRT-PCR反应程序:
50℃ 15分钟一般可以得到理想的反转录效果,但如果片段较长,也可以增加至30分钟。在Real-time PCR反应前进行模板的预变性,通常设定为95℃ 2分钟,复杂或高GC模板适当延长时间至5分钟。本产品中的BeyoFast™ Taq DNA Polymerase可以在15秒内可完成至少300bp的扩增,可以满足绝大多数的qPCR实验;对于超过350bp或者高GC含量的扩增子,建议增加延伸时间至60秒或者采用三步法以提高扩增效率。