KO问答

1.你们的基因敲除(KO)细胞系是如何构建的？

我们的 KO 细胞系使用 CRISPR/Cas9 技术构建。KO 细胞系是单克隆细胞系，并经高通量测序验证。

2.是否对 KO 细胞系的支原体进行了检测？

是的，我们使用支原体检测试剂盒对细胞系库进行了支原体检测。我们还会定期抽查库存。

3.能否提供无支原体证书的副本？

可以。请联系我们的技术支持团队，他们将为您提供。

4.收到细胞后应如何保存？

如果您不打算立即对细胞进行复苏，建议您收到细胞后立即将小瓶存放在液氮中。

5. 我可以使用自己的野生型细胞系吗，还是必须购买你们的细胞系？

可以，您可以自己提供细胞系，也可以从我司处购买。 

6.应该购买哪种野生型（WT）细胞系作为 KO 细胞系的对照？

请查看 KO 细胞系数据表，了解我们推荐的 WT 以及订购方法。如有疑问，请联系我们的技术支持团队。

7.细胞系的传代次数是多少？

这些细胞的传代次数均小于 20。如需要所购批次的确切传代次数，请联系我们。

8.细胞中是否有抗生素？

克隆体是使用嘌呤霉素抗性基因筛选的。

9.应该如何培养细胞？

请查看 KO 细胞系说明书或联系我们获取我们的细胞培养方案。

10.细胞所在的标准介质配方是什么？

使用的是细胞冷冻培养基 - 10%DMSO+90% FBS 培养基。

11.如何在研究中使用基因敲除细胞系

基因敲除细胞系可用于生命科学领域的多种应用，如药物发现和检测开发、抗体特异性验证、研究信号传导通路。

12.敲除验证是什么？

敲除验证（KO 验证）是抗体特异性验证的金标准。我司使用通过 CRISPR/Cas9 产生的人类 KO 单倍体细胞模型进行 KO 验证。

13. 是否可以一定确保蛋白不表达？

首先保证蛋白不表达从科学的角度上来讲，无论是采用移码突变还是片段敲除都不可能什么细胞或基因都保证蛋白不表达。例如移码突变的mRNA可能发生可变剪切，直接跳过移码部位进行翻译，导致蛋白有表达；或者蛋白表达功能域的位点刚好处于切割位点更靠前的区域等。

因此我们不会草率地说我们保证蛋白不表达，这是有悖于科学原理的，但我们可通过最优的gRNA设计，从根源上避免蛋白残留问题，再结合抗体分析，及实验过程中阶段性WB测试，为您提供科学的解决方案，让您不再为KO细胞蛋白残留问题而发愁。

14. KO单克隆与KO cell pool的区别？

KO单克隆是指所有细胞均由一个测序验证的纯合子细胞增殖而来的，所有细胞的基因型都是一样的。KO cell pool是指没经过单克隆化和筛选的细胞池，因此可以理解为这群细胞中包含KO纯合子，杂合子和野生型，我们在拿到KO cell pool后须根据后续的实验需求挑取单克隆。

15.是否能提供细胞冻存服务？

可以，细胞敲除后，我们可以免费提供细胞冻存服务。