全唾液核酸提取试剂盒

试剂盒采用磁珠法来提取唾液中的核酸，磁珠表面含有特殊的化学基团，能够与溶液中的核酸进行特异性吸附，从而获得核酸。本试剂盒提取的核酸可以适用于各种常规的分子实验，本试剂盒操作安全、简便，获取的核酸质量高。

1产品组分

2 保存环境

15-25℃，室温运输。磁珠（Beads)请放置于4℃保存。

3 使用范围

本产品适用唾液样本，基于磁珠法吸附原理磁性分离器，提取核酸产物能够用于下游的检测应用。

4 自备材料

5mL EP管、水浴锅、磁力架、旋转仪（或摇床）、涡旋仪

5 注意事项

1）磁珠使用前必须充分震荡涡旋，使其分布均匀。为了能够更好的降低RNA的降解，建议磁珠在使用前使用无RNA酶水进行2次清洗，并用无RNA酶水配置20%的无水乙醇溶液进行保存。

2）提前将水浴锅加热至65℃。

3）唾液样本要求：采样前30分钟漱口且勿进食、饮水等，采集唾液时用舌头刮上下颚，或用牙齿刮舌头和脸颊内壁，向干净的采集管中轻轻吐出口腔唾液至少1ml体积（不包括泡沫部分）。请采集样本完毕后，将唾液与唾液采集管内的保存液及时混合，置于4℃保存。

4）本试剂盒提取的核酸为RNA、DNA混合物，若仅需RNA，可以添加DNase进行DNA的去除，若仅需要DNA，可以添加RNase进行RNA的去除。

6 提取方法

1.取干净的5mL EP管，加入2.34mL的LB、1mL的唾液样本，利用移液枪吹打3-5次至无明显的细胞团块后，向其中加入80µL的Beads（用前请将磁珠充分震荡混匀），并将其置于旋转仪上中速转动混匀10min。

2.将上述EP管置于磁性分离器上，静置1min，缓慢吸弃上清。并向EP管中加入500μL wash I，置于旋转仪上中速转动1min，再将其置于磁性分离器上，静置1min，缓慢吸弃上清。

3.加入500uL Wash II，置于旋转仪上中速转动1min，再将其置于磁性分离器上，静置1min，缓慢吸弃上清。

4.重复上述3操作一次，确保上清吸弃干净。打开管盖，将磁珠在室温下干燥4-5min。

5.向上述管中加入80-200μL RNase-free ddH2O，并将其置于65°的水浴锅中洗脱8-10min，期间需要震动3-4次，最后将其置于磁性分离器上，静置1min，并将洗脱下来的核酸上清移至干净的1.5mLEP管中保存。

7 常见问题

1. 核酸产量低

洗脱的时候未能够充分震荡，导致洗脱液未能够与磁珠充分结合，建议增加震荡次数。

洗脱时间不充分，建议延长洗脱时间，以保证核酸的产量。

2. 核酸的质量不高

建议唾液样本保存不当，建议采用新鲜的唾液样本，唾液样本采样后放置4℃，尽量保证在72小时以内使用。