CRISPR /Cas9 miRNA/ lncRNA 敲除细胞系

 产品介绍

       CRISPR/Cas9系统是当前研究和发展最为成熟的基因编辑系统，基于该系统，我们在多种小鼠、大鼠和人源细胞中实现了基因敲除，且筛选到基因敲除的纯合子。sgRNA的选择是决定基因敲除效率的关键因素之一，基于经验或各种在线网站设计的sgRNA并非每条都能引导基因编辑的发生，我们还发现相同的sgRNA在不同细胞中诱发的基因编辑效果参差不齐，这可能和靶序列的DNA结构和修饰状态有关。

        对于单个基因的敲除，我们建议至少设计3个sgRNA的靶点；对于多个基因的敲除，建议先在靶细胞中测试不同sgRNA的编辑效果，挑选每个基因最合适的sgRNA序列。

基因敲除细胞系服务内容：

基因情况：单基因或者多基因敲除

细胞类型：贴壁细胞、悬浮细胞

服务承诺：提供单克隆细胞株

服务周期：2-4个月

服务优势：

1、精准高效   高效的CRISPR/Cas9系统，有效敲除目的基因，无物种限制，靶向精确性更高，有效降低脱靶对敲除效果的影响；

2、交付快速    优惠的服务价格，较短的实验周期；

3、团队专业    我司Cas9基因编辑团队目前已完成60余例细胞基因敲除案例，具备丰富的经验；

4、种子优良    所有细胞种子均从中科院细胞库购买，代数低无污染；

5、敲除无损    所有的敲除单克隆均通过多代次测序验证，确保敲除性状稳定不回复；

6、质控严格    建系后连续3代细胞增殖活力评估。

细胞基因敲除方案：

碧基Cas9（碧基生物）根据客户需求，结合靶基因的情况进行方案定制。通常情况下，对于每个基因，我们会设计3条sgRNA，靶向切割位置靠前的外显子区域，通过细胞自身的非同源修复机制，在切割位置产生碱基的突变、插入或部分DNA序列的删除，造成错义突变、无义突变、移码突变、片段缺失，进而影响下游RNA或蛋白的功能。

此外，碧基生物CRISPR/Cas9研发团队推出pWST-KOS系列质粒，可同时介导多个基因靶点的切割，实现基因的大片段删除，或同时删除多个基因！

操作步骤：

1、Cas9基因目标靶点的确定；

2、sgRNA的设计合成，Cas9载体构建及敲除效率测试；

3、病毒包装与转染；

4、稳转细胞系筛选；

5、单克隆筛选；

6、纯合子鉴定；

6、实验报告整理、细胞冻存。

交付内容：

1、经测序验证的目的基因敲除细胞株及对照细胞株各2支，每支细胞量不少于1*106 Cells。

2、详尽的实验报告：包括细胞株培养信息、实验步骤；sgRNA序列及测序峰图；单克隆筛选测序验证报告。

BioGene Cas9 Inc.

Add:  Block D，Erlang High-Tech pioneering zone，Jiulongpo District，Chongqing，P.R.China.  404000

Website: www.bg-cas9.com    

E-mail: bgcas9@163.com

Tel: 400-675-6758, 86-023-65316016/65316556  

Fax: 86-023-65316556